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Top-Down质谱表征新方法的研究和发展

研发家 | 2025-05-13

近日，中国科学院大连化学物理研究所研究员王方军团队与中国科学技术大学黄光明教授团队合作，发展了top-Down质谱表征。(UVPD-TDMS)新方法为细胞中蛋白质原点质谱的表征和组合构象异质分析提供了创新的分析技术。相关成果发表在《美国化学会志》上。

细胞中的软蛋白质通常同时具有多种形象，不同的形象具有不同的配体结合能力，生物通过调整不同形象的分布比例来实现蛋白质生物功能的精细调节。然而，大多数细胞中的蛋白质结构和活性表征都是通过纯蛋白在体外完成的，很难避免纯化过程和缓冲溶液对蛋白质结构的影响。

在这项工作中，研究小组通过诱导电喷离子化设备，成功实现了大肠杆菌细胞中钙调蛋白的原点离子化和质谱的直接检测。分析发现，与纯化蛋白相比，胞内钙调蛋白有三个主要的并存构象，具有更高的伸展构象。此外，团队选择了UVPD-TDMS技术来分析不同的Ca2 结合组合构象的融合方式和结构类型，发现Ca2 与伸展构象相比，紧凑构象具有更好的Ca2，结合能力受构象调节。结合能力。

本文提出了细胞内蛋白原点TDMS表征的新概念，通过精确选择细胞内蛋白组合和构象特异性UVPD-TDMS分析，并展示了a-， x-, c-, z-在表征组合构象异质性方面，光解离特性残片具有独特的优点。

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